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病原体PCR技术转化

病原体PCR技术转化

病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展。目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应（PCR）等。

 

PCR是一种在体外用已知寡核苷酸引物引导微量待测基因片段进行扩增的技术。PCR技术能够在短时间内获得大量DNA片段，灵敏度高、特异性强，因而广泛应用于病原微生物、遗传病相关基因、肿瘤相关基因、优生优育等领域的检测。实时荧光定量PCR是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，其具有高度灵敏、高度特异、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，对病原体早期确诊、窗口期筛查、疗效检测、基因变异分析和预后评估等具有重要价值，为流行病学调查提供帮助。荧光基团标记的特异性探针可准确反映病原体感染和药物疗效，特别适用于不可人工培养和难以培养的病原体如病毒、衣原体等感染的诊断。

 

分子诊断技术临床医学转化中心（分子诊断中心）为适应临床对疾病诊断及疗效监测的需求，提高相关病原体检验方法的灵敏度和准确性，已开展多种病原体核酸检测，如结核分枝杆菌、肺炎支原体、沙眼衣原体、解脲支原体、淋球菌、HPV定量分型等。 

 


      图1. 实时荧光定量PCR的基本原理

 

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